細胞周期

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　細胞周期

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	細胞周期サイボウシュウキ
1	70％コンフルになったら、夜ヨル8時ジに2mM Thymidineが入ハイったメディウムに変カえる。
2	1の14時間後ジカンゴ(翌日ヨクジツ朝アサ10時ジ)に細胞サイボウをPBS(+)で三回サンカイ洗アラった後アト、ノーマルメディウムを入イれる。
3	2の11時間後ジカンゴ(翌ヨクジツ日ジツ夜ヨル9時ジ)に1ug(マイクログラム)／ml　 aphidicolineが入ハイったメディウムに変カえる。
4	3の14時間後ジカンゴ(翌々日ヨクヨクジツ朝アサ11時ジ)に細胞をPBS(+)で三回洗った後、ノーマルメディウムを入れ、
	そこから1時間毎に細胞を回収する。

	細胞サイボウ回収カイシュウ・固定コテイの方法ホウホウ
1	細胞サイボウをPBS(-)で洗アラい、トリプシンで細胞サイボウをはがし、PBSに回収カイシュウして、CF1200rpm 5minする。
2	上清ジョウセイを取トり除ノゾき、300ulPBS(-)に懸濁ケンダクし、そこへ徐々ジョジョに100%EtOHを700ul加クワえ,細胞サイボウを固定コテイする。
3	-30度ドで1年ネン程度テイド保存ホゾン可能カノウ。

	FACS
1	保存ホゾンしておいた細胞サイボウを常温ジョウオンに戻モドす。
2	CF　1000rpm　5min
3	1mlのPBSに懸濁ケンダクし、RNaseを0.02ugとなるように加クワえ、30分フン静置セイチ。
4	PIを50ug/mlとなるように加クワえ、FACSを行オコナう。

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